一、功能结构与组成

CF633 HSA：远红色荧光染料（激发630nm/发射650nm）与HSA共价偶联的标记物，具有高光稳定性和低背景干扰特性，适用于神经元追踪、脂筏结构研究及多色荧光实验（如与CF488A联用）。

CF640R HSA：远红外荧光染料（激发642nm/发射662nm）标记的HSA，穿透力强且自发荧光干扰低，常用于细胞膜糖蛋白标记、多色成像（如与CF594搭配）及活细胞动态观测（如神经元发育）。

CF680 HSA：近红外荧光染料（激发680nm/发射701nm）标记的HSA，穿透深度达数毫米，适合活体成像、肿瘤靶向示踪及深层组织检测（如血管/溶酶体标记）。

二、核心区别

CF633

荧光特性：远红色（630/650nm）

穿透能力：中等（适合细胞级成像）

光稳定性：优异（抗光漂白，适合长时间观察）

典型应用：神经元追踪、脂筏研究

CF640R

荧光特性：远红外（642/662nm）

穿透能力：较强（减少自发荧光干扰）

光稳定性：高（优于Alexa Fluor 647）

典型应用：多色成像、细胞膜标记

CF680

荧光特性：近红外（680/701nm）

穿透能力：极强（深层组织/活体成像）

光稳定性：优异（耐pH4-10，适合复杂环境）

典型应用：活体成像、肿瘤靶向、药物递送

联系与共性

生物相容性：均基于HSA/BSA的生物相容性，毒性低，适用于体内外实验。

实验兼容性：均可用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot、ELISA等，支持多色成像（需避免光谱重叠）。

标记原理：通过NHS酯与蛋白质赖氨酸残基共价偶联，保留HSA的抗原性和功能。

三、使用场景常见问题及解决方法

背景干扰/自发荧光

问题：生物样本（如植物、厚组织）自发荧光干扰信号。

解决：选择远红外/近红外染料（如CF640R/CF680），使用窄带滤光片或光谱解混软件。

荧光淬灭

问题：储存不当（反复冻融/光照）、pH偏离（如CF640R在pH<4或>10失活）。

解决：避光-20℃分装保存；调节缓冲液pH至7.0-8.5；使用高纯度PBS/HEPES稀释。

非特异性结合

问题：染料比例过高（DOL>5）、未封闭非特异性位点。

解决：优化染料-蛋白比例（DOL 2-5）；使用BSA/血清封闭样本；透析或凝胶过滤纯化标记物。

光谱重叠

问题：多色实验中染料发射光谱重叠（如CF640R与Alexa Fluor 647）。

解决：选择光谱间隔大的染料（如CF640R与CF594）；使用超分辨率显微镜或流式细胞仪的多色通道校准。

光稳定性不足

问题：长时间曝光导致信号衰减。

解决：使用抗淬灭剂（如甘油）；减少激发光强度/时间；选择高光稳定性染料（如CF633）。

应用场景示例

CF633：神经元轴突追踪、脂筏结构可视化、GM1糖脂检测（与霍乱毒素B亚基结合）。

CF640R：细胞膜糖蛋白标记、多色免疫荧光、活细胞动态成像（如内吞过程追踪）。

CF680：活体动物肿瘤成像、血管/溶酶体标记、药物递送系统评价（如纳米颗粒分布追踪）。

四、关联试剂

DBCO-PEG5-GGG-Amine

BODIPY R6G Methyl Ester

HMSiR-Amide-PEG1-Azide

Sulfo-Cyanine5-alkyne

BSA-AF750

Alexa Fluor 343-NHS ester

N3-PEG23-N3

N3-PEG35-N3

N3-PEG47-N3

Azide-PEG3-Azide

Azide-PEG4-Azide

Azide-PEG5-Azide

Azide-PEG6-Azide

Azide-PEG8-Azide

Azide-PEG10-Azide

Azide-PEG12-Azide

Azide-PEG16-Azide

Methyltetrazine-PEG4-maleimide

Alexa Fluor 430 N-hydroxysuccinimide ester

（本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理）返回搜狐，查看更多